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Kit de detecção para RNA do vírus da doença de Newcastle (sondagem de fluorescência de PCR)
【Nome do Produto】Kit de detecção de PCR em tempo real para o vírus da doença de Newcastle
【Pacote】50 kits/caixa
【Indicação】O kit de detecção de PCR em tempo real para o vírus da doença de Newcastle é aplicável para detectar o RNA do vírus da doença de Newcastle em swab de garganta aviária, swab de cloaca, tecido, fluido alantóide de embrião de galinha e cultura de células.Os resultados do teste são apenas para fins de pesquisa e não para diagnóstico clínico.
【Principais componentes e conteúdo】
Nome | Especificação | Quantidade |
Solução de Reação NDV | 1150µl/Tubo | 1 |
NDV Controle Positivo | 100µl/Tubo | 1 |
Controle negativo | 100µl/Tubo | 1 |
【Armazenamento e Prazo de Validade】
Armazenado a -20 ± 5 ℃, congelamento e descongelamento repetidos ≤ 3 vezes, a vida útil é de 12 meses.
【Método de teste】
1. Extração de Ácido Nucleico
O kit de extração de RNA comercializado pode ser realizado para extração de ácido nucleico, siga as instruções do kit.
2. amplificação por PCR
2.1 Calcule o número de amostras de teste, pegue n+2 tubos de reação de PCR e adicione 23 µl de solução de reação a cada tubo.
2.2 Adicione 2 µl de ácido nucleico de controle negativo, controle positivo e amostras nos tubos de reação PRC acima, respectivamente, centrifugue a 8.000 rpm por vários segundos e coloque-os no amplificador PCR quantitativo fluorescente.
2.3 O modo de detecção da sonda é definido como: Reporter Dye1: FAM e Quencher Dye:NONE.
2.4 As condições de reação são definidas da seguinte forma:
55 ℃ por 15 minutos, um ciclo; 95℃ por 30s, um ciclo; 95 ℃ por 10s → 60 ℃ por 30s (colete a fluorescência), 40 ciclos.Salve o arquivo e execute-o.
【Interpretação dos resultados】
1. Os seguintes requisitos devem ser atendidos ao mesmo tempo em um experimento, caso contrário, o experimento é inválido e precisa ser repetido.
O controle negativo não tinha curva de amplificação
A curva de amplificação do canal FAM de controle positivo teve uma fase de crescimento logarítmica significativa, e o valor Ct da curva de amplificação do canal FAM foi ≤ 32.
2. Se o canal FAM da amostra de teste não tiver curva de amplificação, a amostra pode ser determinada como NDV negativa.Se o canal FAM tiver uma curva de amplificação da fase de crescimento logarítmica e o valor Ct ≤ 36, que pode ser determinado como NDV positivo.36 < valor Ct < 40 são amostras suspeitas, que precisam ser testadas novamente para confirmação.
【Precauções】
1. A gestão do laboratório deve estar em estrita conformidade com as especificações de gestão do laboratório de amplificação de genes por PCR.O pessoal do laboratório deve ser treinado profissionalmente.O processo experimental deve ser conduzido rigorosamente em diferentes áreas (área de preparação de reagentes, área de preparação de amostras, área de amplificação e análise de produtos).Todos os consumíveis devem ser descartáveis após a esterilização.Aparelhos, equipamentos e suprimentos especiais em cada estágio da operação do experimento não devem ser usados de forma cruzada.
2. Prepare a cabine de segurança biológica para o estágio de preparação de reagentes e amostras.O jaleco, luvas descartáveis e pipetador devem ser realizados durante o experimento.
3. O congelamento e descongelamento repetidos de reagentes devem ser evitados tanto quanto possível.Antes do uso, os reagentes devem ser completamente descongelados e centrifugados a 8000rpm por alguns segundos.
4. Por favor, coloque a pipeta usada na área de preparação da amostra no recipiente contendo desinfetante e descarte com o lixo após a esterilização.
5. Após o experimento, a mesa de trabalho e o pipetador foram tratados com hipoclorito 10% ou álcool 75% ou lâmpada ultravioleta.
【Fabricação】
Nome: Shandong Xinda Gene Technology Co., Ltd
Uma subsidiária da Shandong Sinder Technology Co., Ltd
Endereço: Edifício B2, Parque Industrial de Bandaohuigu, Estrada Shungeng, Cidade Zhucheng, Província de Shandong
Código Postal: 262233
Telefone: +86 - 0532 5882 0810
Kit de detecção para RNA do vírus da doença de Newcastle (sondagem de fluorescência de PCR)
【Nome do Produto】Kit de detecção de PCR em tempo real para o vírus da doença de Newcastle
【Pacote】50 kits/caixa
【Indicação】O kit de detecção de PCR em tempo real para o vírus da doença de Newcastle é aplicável para detectar o RNA do vírus da doença de Newcastle em swab de garganta aviária, swab de cloaca, tecido, fluido alantóide de embrião de galinha e cultura de células.Os resultados do teste são apenas para fins de pesquisa e não para diagnóstico clínico.
【Principais componentes e conteúdo】
Nome | Especificação | Quantidade |
Solução de Reação NDV | 1150µl/Tubo | 1 |
NDV Controle Positivo | 100µl/Tubo | 1 |
Controle negativo | 100µl/Tubo | 1 |
【Armazenamento e Prazo de Validade】
Armazenado a -20 ± 5 ℃, congelamento e descongelamento repetidos ≤ 3 vezes, a vida útil é de 12 meses.
【Método de teste】
1. Extração de Ácido Nucleico
O kit de extração de RNA comercializado pode ser realizado para extração de ácido nucleico, siga as instruções do kit.
2. amplificação por PCR
2.1 Calcule o número de amostras de teste, pegue n+2 tubos de reação de PCR e adicione 23 µl de solução de reação a cada tubo.
2.2 Adicione 2 µl de ácido nucleico de controle negativo, controle positivo e amostras nos tubos de reação PRC acima, respectivamente, centrifugue a 8.000 rpm por vários segundos e coloque-os no amplificador PCR quantitativo fluorescente.
2.3 O modo de detecção da sonda é definido como: Reporter Dye1: FAM e Quencher Dye:NONE.
2.4 As condições de reação são definidas da seguinte forma:
55 ℃ por 15 minutos, um ciclo; 95℃ por 30s, um ciclo; 95 ℃ por 10s → 60 ℃ por 30s (colete a fluorescência), 40 ciclos.Salve o arquivo e execute-o.
【Interpretação dos resultados】
1. Os seguintes requisitos devem ser atendidos ao mesmo tempo em um experimento, caso contrário, o experimento é inválido e precisa ser repetido.
O controle negativo não tinha curva de amplificação
A curva de amplificação do canal FAM de controle positivo teve uma fase de crescimento logarítmica significativa, e o valor Ct da curva de amplificação do canal FAM foi ≤ 32.
2. Se o canal FAM da amostra de teste não tiver curva de amplificação, a amostra pode ser determinada como NDV negativa.Se o canal FAM tiver uma curva de amplificação da fase de crescimento logarítmica e o valor Ct ≤ 36, que pode ser determinado como NDV positivo.36 < valor Ct < 40 são amostras suspeitas, que precisam ser testadas novamente para confirmação.
【Precauções】
1. A gestão do laboratório deve estar em estrita conformidade com as especificações de gestão do laboratório de amplificação de genes por PCR.O pessoal do laboratório deve ser treinado profissionalmente.O processo experimental deve ser conduzido rigorosamente em diferentes áreas (área de preparação de reagentes, área de preparação de amostras, área de amplificação e análise de produtos).Todos os consumíveis devem ser descartáveis após a esterilização.Aparelhos, equipamentos e suprimentos especiais em cada estágio da operação do experimento não devem ser usados de forma cruzada.
2. Prepare a cabine de segurança biológica para o estágio de preparação de reagentes e amostras.O jaleco, luvas descartáveis e pipetador devem ser realizados durante o experimento.
3. O congelamento e descongelamento repetidos de reagentes devem ser evitados tanto quanto possível.Antes do uso, os reagentes devem ser completamente descongelados e centrifugados a 8000rpm por alguns segundos.
4. Por favor, coloque a pipeta usada na área de preparação da amostra no recipiente contendo desinfetante e descarte com o lixo após a esterilização.
5. Após o experimento, a mesa de trabalho e o pipetador foram tratados com hipoclorito 10% ou álcool 75% ou lâmpada ultravioleta.
【Fabricação】
Nome: Shandong Xinda Gene Technology Co., Ltd
Uma subsidiária da Shandong Sinder Technology Co., Ltd
Endereço: Edifício B2, Parque Industrial de Bandaohuigu, Estrada Shungeng, Cidade Zhucheng, Província de Shandong
Código Postal: 262233
Telefone: +86 - 0532 5882 0810
