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HPAI PCR trivalente

Este kit de PCR para vírus da gripe aviária H5/H7/RNA universal (sondagem de fluorescência de PCR) é aplicável para detectar o vírus da gripe aviária H5/H7/RNA universal em swab de garganta aviária, swab de cloaca, tecido, fluido alantóide de embrião de galinha e cultura de células .
 
Vantagens:
1. Certificados GMP, ISO 9001
2. O produto é avaliado pelo Laboratório Nacional da Gripe Aviária do Centro de Epidemiologia e Saúde Animal da China.
3. Alta estabilidade e eficácia.
4. Personalização e embalagem múltipla
Status de disponibilidade:

Kit de detecção para vírus da gripe aviária H5/H7/subtipo universal de RNA (sondagem de fluorescência de PCR)


【Nome do Produto】Kit de detecção para vírus da gripe aviária H5/H7/subtipo universal de RNA (sondagem de fluorescência de PCR)

【Pacote】50 kits/caixa

【Indicação】O kit de detecção para vírus da gripe aviária H5/H7/RNA universal (sondagem de PCR-fluorescência) é aplicável para detectar o vírus da gripe aviária H5/H7/RNA universal em swab de garganta aviária, swab de cloaca, tecido, fluido alantóide de embrião de galinha e cultura celular .Os resultados do teste são apenas para fins de pesquisa e não para diagnóstico clínico.

Principais componentes e conteúdo

Nome

Especificação

Quantidade

H5/H7/Solução de Reação Trivalente Universal

1250µl/Tubo

1

H5/H7/Controle Positivo Universal

250µl/Tubo

1

Controle negativo

250µl/Tubo

1

Armazenamento e Prazo de Validade

Armazenado a -20 ± 5 ℃, congelamento e descongelamento repetidos ≤ 3 vezes, a vida útil é de 12 meses.

Modelo

ABI 7500, ABI QuantStudio 5, CFX Connect, CFX Opus 96, LightCycler480, Gentiter 96E/96R, LineGene 9600 Plus e outros amplificadores PCR quantitativos fluorescentes.

Método de teste

1. Extração de Ácido Nucleico

O kit de extração de RNA comercializado pode ser realizado para extração de ácido nucleico, siga as instruções do kit.

2. amplificação por PCR

2.1 Calcule o número de amostras de teste, pegue n+2 tubos de reação de PCR e adicione 25µl de solução de reação a cada tubo.

2.2 Adicione 5 µl de ácido nucleico de controle negativo, controle positivo e amostras nos tubos de reação PRC acima, respectivamente, centrifugue a 8000 rpm por vários segundos e coloque-os no amplificador PCR quantitativo fluorescente.

2.3 As condições de reação são definidas da seguinte forma:

Parâmetros relevantes do amplificador

Sistema

Volume total: 30µl

Coleta de sinais

Gripe Aviária H5/H7/Universal

Subtipo H5 - canal HEX coleta sinal de fluorescência

Subtipo H7 - canal FAM coleta sinal de fluorescência

Universal - canal ROX coleta sinal de fluorescência



condições de reação de PCR

Estágio

Condition

número do ciclo

Transcrição reversa

55 ℃: 15 minutos

1

Pré-degeneração

95 ℃: 30 segundos

1


PCR

95 ℃: 10 segundos


40

56 ℃: 30 segundos

(Defina para coletar o sinal fluorescente no final deste estágio)


Interpretação dos resultados

1. Determinação da eficácia do kit de teste:

(1) Controle positivo fraco: valor Ct dos canais FAM, HEX e ROX ≤ 32, curva de amplificação com fase exponencial óbvia.

(2) Controle em branco: os canais FAM, HEX e ROX não têm curva de amplificação, ou a curva de amplificação é reta ou ligeiramente oblíqua, sem fase exponencial significativa e valor de Ct ≥ 38 ou nenhum valor de Ct.

2. Determinação dos resultados:

Julgamento do resultado

canal FAM

canal HEX

canal ROX

Vírus da gripe aviária subtipo H5 ácido nucleico positivo

-

+

+

Vírus da gripe aviária subtipo H7 ácido nucleico positivo

+

-

+

Ácido nucleico do vírus da gripe aviária de baixa patogenicidade positivo

-

-

+

Vírus da influenza aviária H5/H7 subtipo ácido nucleico positivo

+

+

+

Ácido nucléico do vírus da influenza aviária negativo

-

-

-

*Observação:

(1) Se houver uma curva logarítmica de amplificação da fase de crescimento e valor de Ct ≤ 36, ela é julgada como +.Se não houver curva de amplificação ou valor de Ct > 36, é julgado como -.As amostras são suspeitas quando 36 < valor Ct <40, que deve ser testado novamente.

(2) Se o resultado de qualquer subtipo H5/H7 for + com canal ROX -, ele deve ser testado novamente.

Precauções

1. A gestão do laboratório deve estar em estrita conformidade com as especificações de gestão do laboratório de amplificação de genes por PCR.O pessoal do laboratório deve ser treinado profissionalmente.O processo experimental deve ser conduzido rigorosamente em diferentes áreas (área de preparação de reagentes, área de preparação de amostras, área de amplificação e análise de produtos).Todos os consumíveis devem ser descartáveis ​​após a esterilização.Aparelhos, equipamentos e suprimentos especiais em cada estágio da operação do experimento não devem ser usados ​​de forma cruzada.

2. Prepare a cabine de segurança biológica para o estágio de preparação de reagentes e amostras.O jaleco, luvas descartáveis ​​e pipetador devem ser realizados durante o experimento.

3. O congelamento e descongelamento repetidos de reagentes devem ser evitados tanto quanto possível.Antes do uso, os reagentes devem ser completamente descongelados e centrifugados a 8000rpm por alguns segundos.

4. Por favor, coloque a pipeta usada na área de preparação da amostra no recipiente contendo desinfetante e descarte com o lixo após a esterilização.

5. Após o experimento, a mesa de trabalho e a pipeta foram tratadas com hipoclorito 10% ou álcool 75% ou lâmpada ultravioleta.


Fabricação

Nome: Shandong Xinda Gene Technology Co., Ltd

Uma subsidiária da Shandong Sinder Technology Co., Ltd

Endereço: Edifício B2, Parque Industrial Bandaohuigu, Estrada Shungeng, Cidade Zhucheng, Província de Shandong

Código Postal: 262233

Telefone: +86 - 0532 5882 0810


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