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Kit de Detecção de ARN do Subtipo H5/H7 do Vírus da Influenza Aviária (sondagem por PCR-Fluorescência)
(Nome do Produto)Kit de Detecção de ARN do Subtipo H5/H7 do Vírus da Influenza Aviária (sondagem por PCR-Fluorescência)
(Pacote)50 kits/caixa
(Indicação)O kit de detecção para vírus da gripe aviária subtipo H5/H7 RNA (sondagem de fluorescência de PCR) é aplicável para detectar o vírus da gripe aviária subtipo H5/H7 RNA em swab de garganta aviária, swab de cloaca, tecido, fluido alantóide de embrião de galinha e cultura de células.Os resultados do teste são apenas para fins de pesquisa e não para diagnóstico clínico.
(Principais componentes e conteúdo)
Nome | Especificação | Quantidade |
Solução de reação H5/H7-AVI | 1250µl/Tubo | 1 |
Controle Positivo H5/H7-AVI | 250µl/Tubo | 1 |
Controle negativo | 250µl/Tubo | 1 |
(Armazenamento e Prazo de Validade)
Armazenado a -20 ± 5 ℃, congelamento e descongelamento repetidos ≤ 3 vezes, a vida útil é de 12 meses.
(Modelo)
ABI 7500, ABI QuantStudio 5, CFX Connect, CFX Opus 96, LightCycler480, Gentiter 96E/96R, LineGene 9600 Plus e outros amplificadores PCR quantitativos fluorescentes.
(Método de teste)
1. Extração de Ácido Nucleico
O kit de extração de RNA comercializado pode ser realizado para extração de ácido nucleico, siga as instruções do kit.
2. amplificação por PCR
2.1 Calcule o número de amostras de teste, pegue n+2 tubos de reação de PCR e adicione 25µl de solução de reação a cada tubo.
2.2 Adicione 5 µl de ácido nucleico de controle negativo, controle positivo e amostras nos tubos de reação PRC acima, respectivamente, centrifugue a 8000 rpm por vários segundos e coloque-os no amplificador PCR quantitativo fluorescente.
2.3 As condições de reação são definidas da seguinte forma:
Parâmetros relevantes do amplificador | |||
Sistema | Volume total: 30µl | ||
Coleta de sinais | Influenza Aviária Subtipo H5/H7 | Subtipo H5 - canal HEX coleta sinal de fluorescência | |
Subtipo H7 - canal FAM coleta sinal de fluorescência | |||
condições de reação de PCR | Estágio | Condition | número do ciclo |
Transcrição reversa | 55 ℃: 15 minutos | 1 | |
Pré-degeneração | 95 ℃: 30 segundos | 1 | |
PCR | 95 ℃: 10 segundos | 40 | |
56 ℃: 30 segundos (Defina para coletar o sinal fluorescente no final deste estágio) |
(Interpretação dos resultados)
1. Determinação da eficácia do kit de teste:
(1) Controle positivo fraco: valor Ct dos canais FAM e HEX ≤ 32, curva de amplificação com fase exponencial óbvia.
(2) Controle em branco: os canais FAM e HEX não têm curva de amplificação, ou a curva de amplificação é reta ou ligeiramente oblíqua, sem fase exponencial significativa e valor de Ct ≥ 38 ou nenhum valor de Ct.
2. Determinação dos resultados:
Julgamento do resultado | canal FAM | canal HEX |
Vírus da gripe aviária subtipo H5 ácido nucleico positivo | - | + |
Vírus da gripe aviária subtipo H7 ácido nucleico positivo | + | - |
Vírus da influenza aviária subtipo H5/H7 ácido nucleico positivo | + | + |
Vírus da gripe aviária subtipo H5/H7 ácido nucleico negativo | - | - |
*Observação: Se houver uma curva logarítmica de amplificação da fase de crescimento e valor de Ct ≤ 36, ela será considerada +.Se não houver curva de amplificação ou valor de Ct > 36, é julgado como -.As amostras são suspeitas quando 36 < valor Ct <40, que deve ser testado novamente.
(Precauções)
1. A gestão do laboratório deve estar em estrita conformidade com as especificações de gestão do laboratório de amplificação de genes por PCR.O pessoal do laboratório deve ser treinado profissionalmente.O processo experimental deve ser conduzido rigorosamente em diferentes áreas (área de preparação de reagentes, área de preparação de amostras, área de amplificação e análise de produtos).Todos os consumíveis devem ser descartáveis após a esterilização.Aparelhos, equipamentos e suprimentos especiais em cada estágio da operação do experimento não devem ser usados de forma cruzada.
2. Prepare a cabine de segurança biológica para o estágio de preparação de reagentes e amostras.O jaleco, luvas descartáveis e pipetador devem ser realizados durante o experimento.
3. O congelamento e descongelamento repetidos de reagentes devem ser evitados tanto quanto possível.Antes do uso, os reagentes devem ser completamente descongelados e centrifugados a 8000rpm por alguns segundos.
4. Por favor, coloque a pipeta usada na área de preparação da amostra no recipiente contendo desinfetante e descarte com o lixo após a esterilização.
5. Após o experimento, a mesa de trabalho e a pipeta foram tratadas com hipoclorito 10% ou álcool 75% ou lâmpada ultravioleta.
(Fabricação)
Nome: Shandong Xinda Gene Technology Co., Ltd
Uma subsidiária da Shandong Sinder Technology Co., Ltd
Endereço: Edifício B2, Parque Industrial Bandaohuigu, Estrada Shungeng, Cidade Zhucheng, Província de Shandong
Código Postal: 262233
Telefone: +86 - 0532 5882 0810
Kit de Detecção de ARN do Subtipo H5/H7 do Vírus da Influenza Aviária (sondagem por PCR-Fluorescência)
(Nome do Produto)Kit de Detecção de ARN do Subtipo H5/H7 do Vírus da Influenza Aviária (sondagem por PCR-Fluorescência)
(Pacote)50 kits/caixa
(Indicação)O kit de detecção para vírus da gripe aviária subtipo H5/H7 RNA (sondagem de fluorescência de PCR) é aplicável para detectar o vírus da gripe aviária subtipo H5/H7 RNA em swab de garganta aviária, swab de cloaca, tecido, fluido alantóide de embrião de galinha e cultura de células.Os resultados do teste são apenas para fins de pesquisa e não para diagnóstico clínico.
(Principais componentes e conteúdo)
Nome | Especificação | Quantidade |
Solução de reação H5/H7-AVI | 1250µl/Tubo | 1 |
Controle Positivo H5/H7-AVI | 250µl/Tubo | 1 |
Controle negativo | 250µl/Tubo | 1 |
(Armazenamento e Prazo de Validade)
Armazenado a -20 ± 5 ℃, congelamento e descongelamento repetidos ≤ 3 vezes, a vida útil é de 12 meses.
(Modelo)
ABI 7500, ABI QuantStudio 5, CFX Connect, CFX Opus 96, LightCycler480, Gentiter 96E/96R, LineGene 9600 Plus e outros amplificadores PCR quantitativos fluorescentes.
(Método de teste)
1. Extração de Ácido Nucleico
O kit de extração de RNA comercializado pode ser realizado para extração de ácido nucleico, siga as instruções do kit.
2. amplificação por PCR
2.1 Calcule o número de amostras de teste, pegue n+2 tubos de reação de PCR e adicione 25µl de solução de reação a cada tubo.
2.2 Adicione 5 µl de ácido nucleico de controle negativo, controle positivo e amostras nos tubos de reação PRC acima, respectivamente, centrifugue a 8000 rpm por vários segundos e coloque-os no amplificador PCR quantitativo fluorescente.
2.3 As condições de reação são definidas da seguinte forma:
Parâmetros relevantes do amplificador | |||
Sistema | Volume total: 30µl | ||
Coleta de sinais | Influenza Aviária Subtipo H5/H7 | Subtipo H5 - canal HEX coleta sinal de fluorescência | |
Subtipo H7 - canal FAM coleta sinal de fluorescência | |||
condições de reação de PCR | Estágio | Condition | número do ciclo |
Transcrição reversa | 55 ℃: 15 minutos | 1 | |
Pré-degeneração | 95 ℃: 30 segundos | 1 | |
PCR | 95 ℃: 10 segundos | 40 | |
56 ℃: 30 segundos (Defina para coletar o sinal fluorescente no final deste estágio) |
(Interpretação dos resultados)
1. Determinação da eficácia do kit de teste:
(1) Controle positivo fraco: valor Ct dos canais FAM e HEX ≤ 32, curva de amplificação com fase exponencial óbvia.
(2) Controle em branco: os canais FAM e HEX não têm curva de amplificação, ou a curva de amplificação é reta ou ligeiramente oblíqua, sem fase exponencial significativa e valor de Ct ≥ 38 ou nenhum valor de Ct.
2. Determinação dos resultados:
Julgamento do resultado | canal FAM | canal HEX |
Vírus da gripe aviária subtipo H5 ácido nucleico positivo | - | + |
Vírus da gripe aviária subtipo H7 ácido nucleico positivo | + | - |
Vírus da influenza aviária subtipo H5/H7 ácido nucleico positivo | + | + |
Vírus da gripe aviária subtipo H5/H7 ácido nucleico negativo | - | - |
*Observação: Se houver uma curva logarítmica de amplificação da fase de crescimento e valor de Ct ≤ 36, ela será considerada +.Se não houver curva de amplificação ou valor de Ct > 36, é julgado como -.As amostras são suspeitas quando 36 < valor Ct <40, que deve ser testado novamente.
(Precauções)
1. A gestão do laboratório deve estar em estrita conformidade com as especificações de gestão do laboratório de amplificação de genes por PCR.O pessoal do laboratório deve ser treinado profissionalmente.O processo experimental deve ser conduzido rigorosamente em diferentes áreas (área de preparação de reagentes, área de preparação de amostras, área de amplificação e análise de produtos).Todos os consumíveis devem ser descartáveis após a esterilização.Aparelhos, equipamentos e suprimentos especiais em cada estágio da operação do experimento não devem ser usados de forma cruzada.
2. Prepare a cabine de segurança biológica para o estágio de preparação de reagentes e amostras.O jaleco, luvas descartáveis e pipetador devem ser realizados durante o experimento.
3. O congelamento e descongelamento repetidos de reagentes devem ser evitados tanto quanto possível.Antes do uso, os reagentes devem ser completamente descongelados e centrifugados a 8000rpm por alguns segundos.
4. Por favor, coloque a pipeta usada na área de preparação da amostra no recipiente contendo desinfetante e descarte com o lixo após a esterilização.
5. Após o experimento, a mesa de trabalho e a pipeta foram tratadas com hipoclorito 10% ou álcool 75% ou lâmpada ultravioleta.
(Fabricação)
Nome: Shandong Xinda Gene Technology Co., Ltd
Uma subsidiária da Shandong Sinder Technology Co., Ltd
Endereço: Edifício B2, Parque Industrial Bandaohuigu, Estrada Shungeng, Cidade Zhucheng, Província de Shandong
Código Postal: 262233
Telefone: +86 - 0532 5882 0810