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Kit de detecção de PCR em tempo real para Mycoplasma Synoviae
【Nome do Produto】Kit de detecção de PCR em tempo real para Mycoplasma Synoviae (MS)
【Pacote】50 kits/caixa
【Indicação】O kit de detecção de PCR em tempo real para Mycoplasma Synoviae é aplicável para detectar o DNA de Mycoplasma Synoviae em amostras respiratórias de aves, tecido pulmonar e outras amostras.Os resultados do teste são apenas para fins de pesquisa e não para diagnóstico clínico.
【Principais componentes e conteúdo】
Nome | Especificação | Quantidade |
Solução de Dupla Reação MS | 900µl/Tubo | 1 |
Controle Positivo Duplo MS | 100µl/Tubo | 1 |
Controle negativo | 100µl/Tubo | 1 |
【Armazenamento e Prazo de Validade】
Armazenado a -20 ± 5 ℃, congelamento e descongelamento repetidos ≤ 3 vezes, a vida útil é de 12 meses.
【Teoria】
Este kit é baseado na tecnologia de PCR fluorescente em tempo real. Ele seleciona o vírus selvagem de Mycoplasma Synoviaes e a região conservada da cepa de vacina MS-H como as regiões alvo de amplificação, projeta sondas de primers específicos e marca diferentes grupos fluorescentes e conduz testes qualitativos detecção de Mycoplasma Synoviae através da amplificação do sistema de PCR fluorescente em tempo real de uma etapa. Além de primers específicos e sondas fluorescentes, o sistema de reação também é equipado com tampão de PCR correspondente, enzima Taq.dNTPs, Mg2+ e outros componentes, que podem alcançar a detecção sensível e específica do ácido nucleico MS e identificar o vírus selvagem e a cepa vacinal MS-H.
【Instrumento】ABI 7500, ABI 7300, LightCycler480 ou outros instrumentos PCR quantitativos fluorescentes.
【Requisito de Amostra】
Amostras respiratórias e amostras pulmonares.
【Método de teste】
1. Extração de Ácido Nucleico
O kit de extração de DNA comercializado pode ser realizado para extração de ácido nucleico, siga as instruções do kit.
2. amplificação por PCR
2.1 Calcule o número de amostras de teste, pegue n+2 tubos de reação de PCR e adicione 18µl de solução de reação a cada tubo.
2.2 Adicione 2 µl de ácido nucleico de controle negativo, controle positivo e amostras de ácido nucleico nos tubos de reação PRC acima, respectivamente, centrifugue a 8.000 rpm por vários segundos e coloque-os no amplificador PCR quantitativo fluorescente.
3. amplificação qR-T-PCR
3.1 Seleção do canal de fluorescência
Reporter Dye1: selecione o canal FAM para detectar a cepa da vacina MS-H, Quencher Dye: NENHUM
Reporter Dye2: selecione o canal VIC ou HEX para detectar a cepa do vírus MS selvagem, Quencher Dye2: NONE, referência passiva: NONE.Consulte o manual do instrumento para outros instrumentos.
3.2 As condições de reação são definidas como:
Parâmetros de amplificação | |||
Sistema | O volume total é de 25µl | ||
Condições de Reação de PCR | Estágio | Condições | ciclos |
Pré-desnaturação | 95 ℃ por 5 minutos | 1 | |
PCR | 95 ℃ por 10 segundos |
40 | |
60 ℃ por 30 segundos | |||
【Interpretação dos resultados】
1. Os seguintes requisitos devem ser atendidos ao mesmo tempo em um experimento, caso contrário, o experimento é inválido e precisa ser repetido.
O controle negativo não tinha curva de amplificação
A curva de amplificação do canal FAM de controle positivo teve uma fase de crescimento logarítmica significativa, e o valor Ct da curva de amplificação do canal FAM foi ≤ 32.
2. Se o canal FAM da amostra de teste não tiver curva de amplificação, a amostra pode ser determinada como IBDV negativa.Se o canal FAM tiver uma curva de amplificação da fase de crescimento logarítmica e o valor Ct ≤ 36, que pode ser determinado como IBDV positivo.36 < valor Ct < 40 são amostras suspeitas, que precisam ser testadas novamente para confirmação.
【Precauções】
1. A gestão do laboratório deve estar em estrita conformidade com as especificações de gestão do laboratório de amplificação de genes por PCR.O pessoal do laboratório deve ser treinado profissionalmente.O processo experimental deve ser conduzido rigorosamente em diferentes áreas (área de preparação de reagentes, área de preparação de amostras, área de amplificação e análise de produtos).Todos os consumíveis devem ser descartáveis após a esterilização.Aparelhos, equipamentos e suprimentos especiais em cada estágio da operação do experimento não devem ser usados de forma cruzada.
2. Prepare a cabine de segurança biológica para o estágio de preparação de reagentes e amostras.O jaleco, luvas descartáveis e pipetador devem ser realizados durante o experimento.
3. O congelamento e descongelamento repetidos de reagentes devem ser evitados tanto quanto possível.Antes do uso, os reagentes devem ser completamente descongelados e centrifugados a 8000rpm por alguns segundos.
4. Por favor, coloque a pipeta usada na área de preparação da amostra no recipiente contendo desinfetante e descarte com o lixo após a esterilização.
5. Após o experimento, a mesa de trabalho e o pipetador foram tratados com hipoclorito 10% ou álcool 75% ou lâmpada ultravioleta.
【Fabricação】
Nome: Shandong Xinda Gene Technology Co., Ltd
Uma subsidiária da Shandong Sinder Technology Co., Ltd
Endereço: Edifício B2, Parque Industrial de Bandaohuigu, Estrada Shungeng, Cidade Zhucheng, Província de Shandong
Código Postal: 262233
Telefone: +86 - 0532 5882 0810
Kit de detecção de PCR em tempo real para Mycoplasma Synoviae
【Nome do Produto】Kit de detecção de PCR em tempo real para Mycoplasma Synoviae (MS)
【Pacote】50 kits/caixa
【Indicação】O kit de detecção de PCR em tempo real para Mycoplasma Synoviae é aplicável para detectar o DNA de Mycoplasma Synoviae em amostras respiratórias de aves, tecido pulmonar e outras amostras.Os resultados do teste são apenas para fins de pesquisa e não para diagnóstico clínico.
【Principais componentes e conteúdo】
Nome | Especificação | Quantidade |
Solução de Dupla Reação MS | 900µl/Tubo | 1 |
Controle Positivo Duplo MS | 100µl/Tubo | 1 |
Controle negativo | 100µl/Tubo | 1 |
【Armazenamento e Prazo de Validade】
Armazenado a -20 ± 5 ℃, congelamento e descongelamento repetidos ≤ 3 vezes, a vida útil é de 12 meses.
【Teoria】
Este kit é baseado na tecnologia de PCR fluorescente em tempo real. Ele seleciona o vírus selvagem de Mycoplasma Synoviaes e a região conservada da cepa de vacina MS-H como as regiões alvo de amplificação, projeta sondas de primers específicos e marca diferentes grupos fluorescentes e conduz testes qualitativos detecção de Mycoplasma Synoviae através da amplificação do sistema de PCR fluorescente em tempo real de uma etapa. Além de primers específicos e sondas fluorescentes, o sistema de reação também é equipado com tampão de PCR correspondente, enzima Taq.dNTPs, Mg2+ e outros componentes, que podem alcançar a detecção sensível e específica do ácido nucleico MS e identificar o vírus selvagem e a cepa vacinal MS-H.
【Instrumento】ABI 7500, ABI 7300, LightCycler480 ou outros instrumentos PCR quantitativos fluorescentes.
【Requisito de Amostra】
Amostras respiratórias e amostras pulmonares.
【Método de teste】
1. Extração de Ácido Nucleico
O kit de extração de DNA comercializado pode ser realizado para extração de ácido nucleico, siga as instruções do kit.
2. amplificação por PCR
2.1 Calcule o número de amostras de teste, pegue n+2 tubos de reação de PCR e adicione 18µl de solução de reação a cada tubo.
2.2 Adicione 2 µl de ácido nucleico de controle negativo, controle positivo e amostras de ácido nucleico nos tubos de reação PRC acima, respectivamente, centrifugue a 8.000 rpm por vários segundos e coloque-os no amplificador PCR quantitativo fluorescente.
3. amplificação qR-T-PCR
3.1 Seleção do canal de fluorescência
Reporter Dye1: selecione o canal FAM para detectar a cepa da vacina MS-H, Quencher Dye: NENHUM
Reporter Dye2: selecione o canal VIC ou HEX para detectar a cepa do vírus MS selvagem, Quencher Dye2: NONE, referência passiva: NONE.Consulte o manual do instrumento para outros instrumentos.
3.2 As condições de reação são definidas como:
Parâmetros de amplificação | |||
Sistema | O volume total é de 25µl | ||
Condições de Reação de PCR | Estágio | Condições | ciclos |
Pré-desnaturação | 95 ℃ por 5 minutos | 1 | |
PCR | 95 ℃ por 10 segundos |
40 | |
60 ℃ por 30 segundos | |||
【Interpretação dos resultados】
1. Os seguintes requisitos devem ser atendidos ao mesmo tempo em um experimento, caso contrário, o experimento é inválido e precisa ser repetido.
O controle negativo não tinha curva de amplificação
A curva de amplificação do canal FAM de controle positivo teve uma fase de crescimento logarítmica significativa, e o valor Ct da curva de amplificação do canal FAM foi ≤ 32.
2. Se o canal FAM da amostra de teste não tiver curva de amplificação, a amostra pode ser determinada como IBDV negativa.Se o canal FAM tiver uma curva de amplificação da fase de crescimento logarítmica e o valor Ct ≤ 36, que pode ser determinado como IBDV positivo.36 < valor Ct < 40 são amostras suspeitas, que precisam ser testadas novamente para confirmação.
【Precauções】
1. A gestão do laboratório deve estar em estrita conformidade com as especificações de gestão do laboratório de amplificação de genes por PCR.O pessoal do laboratório deve ser treinado profissionalmente.O processo experimental deve ser conduzido rigorosamente em diferentes áreas (área de preparação de reagentes, área de preparação de amostras, área de amplificação e análise de produtos).Todos os consumíveis devem ser descartáveis após a esterilização.Aparelhos, equipamentos e suprimentos especiais em cada estágio da operação do experimento não devem ser usados de forma cruzada.
2. Prepare a cabine de segurança biológica para o estágio de preparação de reagentes e amostras.O jaleco, luvas descartáveis e pipetador devem ser realizados durante o experimento.
3. O congelamento e descongelamento repetidos de reagentes devem ser evitados tanto quanto possível.Antes do uso, os reagentes devem ser completamente descongelados e centrifugados a 8000rpm por alguns segundos.
4. Por favor, coloque a pipeta usada na área de preparação da amostra no recipiente contendo desinfetante e descarte com o lixo após a esterilização.
5. Após o experimento, a mesa de trabalho e o pipetador foram tratados com hipoclorito 10% ou álcool 75% ou lâmpada ultravioleta.
【Fabricação】
Nome: Shandong Xinda Gene Technology Co., Ltd
Uma subsidiária da Shandong Sinder Technology Co., Ltd
Endereço: Edifício B2, Parque Industrial de Bandaohuigu, Estrada Shungeng, Cidade Zhucheng, Província de Shandong
Código Postal: 262233
Telefone: +86 - 0532 5882 0810
