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Kit de Detecção de PCR para Vírus da Síndrome da Mancha Branca (WSSV) de Camarão (Ensaios de Sonda Fluorescente)
Nome do Produto: Kit de detecção de PCR em tempo real para o vírus da síndrome da mancha branca.
Pacote: 50 kits/caixa
Indicação: Este kit é aplicável à detecção de ácido nucleico do DNA do vírus da síndrome da mancha branca do camarão no tecido muscular do camarão. Os resultados do teste são apenas para fins de pesquisa e não para diagnóstico clínico.
Principais componentes e conteúdo:
Nome | Especificação | Quantidade |
Solução de Reação WSSV | 1000µl/Tubo | 1 |
Controle Positivo WSSV | 250µl/Tubo | 1 |
Controle negativo | 250µl/Tubo | 1 |
Armazenamento e Prazo de Validade:
Armazenado a -20 ± 5 ℃, congelamento e descongelamento repetidos ≤ 3 vezes, a vida útil é de 12 meses.
Método de teste:
1. Extração de Ácido Nucleico
O kit de extração de DNA comercializado pode ser realizado para extração de ácido nucleico, siga as instruções do kit.
2. amplificação por PCR
2.1 Calcule o número de amostras de teste, pegue n+2 tubos de reação de PCR e adicione 20 µl de solução de reação a cada tubo.
2.2 Adicione 5 µl de ácido nucleico de controle negativo, controle positivo e amostras nos tubos de reação PRC acima, respectivamente, centrifugue a 8000 rpm por vários segundos e coloque-os na PCR quantitativa fluorescente.
2.3 As condições de reação são definidas como:
Parâmetros de amplificação | |||
Sistema | O volume total é de 25µl | ||
Coleta de sinais | Sinal de fluorescência WSSV | O canal FAM coleta o sinal de fluorescência | |
Condições de Reação de PCR | Estágio | Condições | ciclos |
Processo UNG | 37 ℃ por 2 minutos | 1 | |
Pré-desnaturação | 95 ℃ por 30 segundos | 1 | |
PCR | 95 ℃ por 10 segundos |
40 | |
60 ℃ por 30 segundos Definido para coletar o sinal fluorescente no final desta fase | |||
Julgamento do resultado:
1. O julgamento de validade:
1.1 Controle Positivo: O valor Ct do canal FAM ≤ 32, e a curva de amplificação tem uma fase de crescimento exponencial significativa.
1.2 Controle Negativo: O canal FAM não possui curva de amplificação, ou a curva de amplificação é reta ou ligeiramente oblíqua, sem fase de crescimento exponencial significativa, e o valor de Ct ≥ 38 ou nenhum valor de Ct.
2. O julgamento do resultado do teste:
2.1 Se houver um crescimento exponencial significativo no canal FAM e valor Ct ≤35, é considerado WSSV positivo.
2.2 Se houver um crescimento exponencial significativo no canal FAM e valor de Ct entre 35-38, isso é considerado suspeito de WSSV.A amostra deve ser testada repetidamente.Se o valor de Ct dos resultados do teste repetido ainda estiver entre 35-38 com um período de crescimento exponencial significativo, ele é considerado positivo, caso contrário, é negativo.
2.3 Se o valor Ct dos resultados do teste FAM > 38 ou nenhum valor Ct, é julgado como WSSV negativo
Precauções:
1. A gestão do laboratório deve estar em estrita conformidade com as especificações de gestão do laboratório de amplificação de genes por PCR.O pessoal do laboratório deve ser treinado profissionalmente.O processo experimental deve ser conduzido rigorosamente em diferentes áreas (área de preparação de reagentes, área de preparação de amostras, área de amplificação e análise de produtos).Todos os consumíveis devem ser descartáveis após a esterilização.Aparelhos, equipamentos e suprimentos especiais em cada estágio da operação do experimento não devem ser usados de forma cruzada.
2. Prepare a cabine de segurança biológica para o estágio de preparação de reagentes e amostras.O jaleco, luvas descartáveis e pipetador devem ser realizados durante o experimento.
3. O congelamento e descongelamento repetidos de reagentes devem ser evitados tanto quanto possível.Antes do uso, os reagentes devem ser completamente descongelados e centrifugados a 8000rpm por alguns segundos.
4. Por favor, coloque a pipeta usada na área de preparação da amostra no recipiente contendo desinfetante e descarte com o lixo após a esterilização.
5. Após o experimento, a mesa de trabalho e a pipeta foram tratadas com hipoclorito 10% ou álcool 75% ou lâmpada ultravioleta.
Fabricação:
Nome: Shandong Xinda Gene Technology Co., Ltd
Uma subsidiária da Shandong Sinder Technology Co., Ltd
Endereço: Edifício B2, Parque Industrial Bandaohuigu, Estrada Shungeng, Cidade Zhucheng, Província de Shandong
Código Postal: 262233
Telefone: +86 - 0532 5882 0810
Kit de Detecção de PCR para Vírus da Síndrome da Mancha Branca (WSSV) de Camarão (Ensaios de Sonda Fluorescente)
Nome do Produto: Kit de detecção de PCR em tempo real para o vírus da síndrome da mancha branca.
Pacote: 50 kits/caixa
Indicação: Este kit é aplicável à detecção de ácido nucleico do DNA do vírus da síndrome da mancha branca do camarão no tecido muscular do camarão. Os resultados do teste são apenas para fins de pesquisa e não para diagnóstico clínico.
Principais componentes e conteúdo:
Nome | Especificação | Quantidade |
Solução de Reação WSSV | 1000µl/Tubo | 1 |
Controle Positivo WSSV | 250µl/Tubo | 1 |
Controle negativo | 250µl/Tubo | 1 |
Armazenamento e Prazo de Validade:
Armazenado a -20 ± 5 ℃, congelamento e descongelamento repetidos ≤ 3 vezes, a vida útil é de 12 meses.
Método de teste:
1. Extração de Ácido Nucleico
O kit de extração de DNA comercializado pode ser realizado para extração de ácido nucleico, siga as instruções do kit.
2. amplificação por PCR
2.1 Calcule o número de amostras de teste, pegue n+2 tubos de reação de PCR e adicione 20 µl de solução de reação a cada tubo.
2.2 Adicione 5 µl de ácido nucleico de controle negativo, controle positivo e amostras nos tubos de reação PRC acima, respectivamente, centrifugue a 8000 rpm por vários segundos e coloque-os na PCR quantitativa fluorescente.
2.3 As condições de reação são definidas como:
Parâmetros de amplificação | |||
Sistema | O volume total é de 25µl | ||
Coleta de sinais | Sinal de fluorescência WSSV | O canal FAM coleta o sinal de fluorescência | |
Condições de Reação de PCR | Estágio | Condições | ciclos |
Processo UNG | 37 ℃ por 2 minutos | 1 | |
Pré-desnaturação | 95 ℃ por 30 segundos | 1 | |
PCR | 95 ℃ por 10 segundos |
40 | |
60 ℃ por 30 segundos Definido para coletar o sinal fluorescente no final desta fase | |||
Julgamento do resultado:
1. O julgamento de validade:
1.1 Controle Positivo: O valor Ct do canal FAM ≤ 32, e a curva de amplificação tem uma fase de crescimento exponencial significativa.
1.2 Controle Negativo: O canal FAM não possui curva de amplificação, ou a curva de amplificação é reta ou ligeiramente oblíqua, sem fase de crescimento exponencial significativa, e o valor de Ct ≥ 38 ou nenhum valor de Ct.
2. O julgamento do resultado do teste:
2.1 Se houver um crescimento exponencial significativo no canal FAM e valor Ct ≤35, é considerado WSSV positivo.
2.2 Se houver um crescimento exponencial significativo no canal FAM e valor de Ct entre 35-38, isso é considerado suspeito de WSSV.A amostra deve ser testada repetidamente.Se o valor de Ct dos resultados do teste repetido ainda estiver entre 35-38 com um período de crescimento exponencial significativo, ele é considerado positivo, caso contrário, é negativo.
2.3 Se o valor Ct dos resultados do teste FAM > 38 ou nenhum valor Ct, é julgado como WSSV negativo
Precauções:
1. A gestão do laboratório deve estar em estrita conformidade com as especificações de gestão do laboratório de amplificação de genes por PCR.O pessoal do laboratório deve ser treinado profissionalmente.O processo experimental deve ser conduzido rigorosamente em diferentes áreas (área de preparação de reagentes, área de preparação de amostras, área de amplificação e análise de produtos).Todos os consumíveis devem ser descartáveis após a esterilização.Aparelhos, equipamentos e suprimentos especiais em cada estágio da operação do experimento não devem ser usados de forma cruzada.
2. Prepare a cabine de segurança biológica para o estágio de preparação de reagentes e amostras.O jaleco, luvas descartáveis e pipetador devem ser realizados durante o experimento.
3. O congelamento e descongelamento repetidos de reagentes devem ser evitados tanto quanto possível.Antes do uso, os reagentes devem ser completamente descongelados e centrifugados a 8000rpm por alguns segundos.
4. Por favor, coloque a pipeta usada na área de preparação da amostra no recipiente contendo desinfetante e descarte com o lixo após a esterilização.
5. Após o experimento, a mesa de trabalho e a pipeta foram tratadas com hipoclorito 10% ou álcool 75% ou lâmpada ultravioleta.
Fabricação:
Nome: Shandong Xinda Gene Technology Co., Ltd
Uma subsidiária da Shandong Sinder Technology Co., Ltd
Endereço: Edifício B2, Parque Industrial Bandaohuigu, Estrada Shungeng, Cidade Zhucheng, Província de Shandong
Código Postal: 262233
Telefone: +86 - 0532 5882 0810
