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Nome do Produto: Kit de Detecção de PCR em Tempo Real para Enterocytozoon Hepatopenaei Disease.
Pacote: 50 teste/caixa
Indicação: Este kit é aplicável à detecção de ácido nucleico do DNA da doença de Enterocytozoon Hepatopenaei (EHP) em tecido muscular de camarão. Os resultados do teste são apenas para fins de pesquisa e não para diagnóstico clínico.
Principais componentes e conteúdo:
Nome | Especificação | Quantidade |
Solução de Reação EHP | 1000µl/Tubo | 1 |
Controle Positivo EHP | 250µl/Tubo | 1 |
Controle negativo | 250µl/Tubo | 1 |
Armazenamento e Prazo de Validade:
Armazenado a -20 ± 5 ℃, congelamento e descongelamento repetidos ≤ 3 vezes, a vida útil é de 12 meses.
Método de teste:
1. Extração de Ácido Nucleico
O kit de extração de DNA comercializado pode ser realizado para extração de ácido nucleico, siga as instruções do kit.
2. amplificação por PCR
2.1 Calcule o número de amostras de teste, pegue n+2 tubos de reação de PCR e adicione 20 µl de solução de reação a cada tubo.
2.2 Adicione respectivamente 5 µl de ácido nucleico de controle negativo, controle positivo e amostras nos tubos de reação PRC acima, centrifugue a 8000 rpm por vários segundos e coloque-os na PCR quantitativa fluorescente.
2.3 As condições de reação devem ser definidas como:
Parâmetros de amplificação | |||
Sistema | O volume total é de 25µl | ||
Coleta de sinais | Sinal de fluorescência EHP | O canal FAM coleta o sinal de fluorescência | |
Condições de Reação de PCR | Estágio | Condições | ciclos |
Processo UNG | 37 ℃ por 2 minutos | 1 | |
Pré-desnaturação | 95 ℃ por 30 segundos | 1 | |
PCR | 95 ℃ por 10 segundos |
40 | |
60 ℃ por 30 segundos Definido para coletar o sinal fluorescente no final desta fase | |||
Interpretação dos resultados:
1. O julgamento de validade:
1.1 Controle Positivo: O valor Ct do canal FAM ≤ 32, e a curva de amplificação tem uma fase de crescimento exponencial significativa.
1.2 Controle Negativo: O canal FAM não tem curva de amplificação, ou a curva de amplificação é reta ou ligeiramente oblíqua.
2. O julgamento do resultado do teste:
Se o canal de detecção FAM da amostra de teste tiver sem curva de amplificação, pode ser determinado como EHP negativo.
Se o canal de detecção FAM tiver uma curva de amplificação de crescimento exponencial e o valor Ct for ≤ 36, pode ser determinado como EHP positivo.
36 amostras devem ser consideradas como resultados duvidosos, e a análise deve ser repetida para confirmação.
Precauções:
1. A gestão do laboratório deve estar em estrita conformidade com as especificações de gestão do laboratório de amplificação de genes por PCR.O pessoal do laboratório deve ser treinado profissionalmente.O processo experimental deve ser conduzido rigorosamente em diferentes áreas (área de preparação de reagentes, área de preparação de amostras, área de amplificação e análise de produtos).Todos os consumíveis devem ser descartáveis após a esterilização.Aparelhos, equipamentos e suprimentos especiais em cada estágio da operação do experimento não devem ser usados de forma cruzada.
2. Prepare a cabine de segurança biológica para o estágio de preparação de reagentes e amostras.O jaleco, luvas descartáveis e pipetador devem ser realizados durante o experimento.
3. O congelamento e descongelamento repetidos de reagentes devem ser evitados tanto quanto possível.Antes do uso, os reagentes devem ser completamente descongelados e centrifugados a 8000rpm por alguns segundos.
4. Por favor, coloque a pipeta usada na área de preparação da amostra no recipiente contendo desinfetante e descarte com o lixo após a esterilização.
5. Após o experimento, a mesa de trabalho e o pipetador foram tratados com hipoclorito 10% ou álcool 75% ou lâmpada ultravioleta.
Fabricação:
Nome: Shandong Xinda Gene Technology Co., Ltd
Uma subsidiária da Shandong Sinder Technology Co., Ltd
Endereço: Edifício B2, Parque Industrial de Bandaohuigu, Estrada Shungeng, Cidade Zhucheng, Província de Shandong
Código Postal: 262233
Telefone: +86 - 0532 5882 0810
Nome do Produto: Kit de Detecção de PCR em Tempo Real para Enterocytozoon Hepatopenaei Disease.
Pacote: 50 teste/caixa
Indicação: Este kit é aplicável à detecção de ácido nucleico do DNA da doença de Enterocytozoon Hepatopenaei (EHP) em tecido muscular de camarão. Os resultados do teste são apenas para fins de pesquisa e não para diagnóstico clínico.
Principais componentes e conteúdo:
Nome | Especificação | Quantidade |
Solução de Reação EHP | 1000µl/Tubo | 1 |
Controle Positivo EHP | 250µl/Tubo | 1 |
Controle negativo | 250µl/Tubo | 1 |
Armazenamento e Prazo de Validade:
Armazenado a -20 ± 5 ℃, congelamento e descongelamento repetidos ≤ 3 vezes, a vida útil é de 12 meses.
Método de teste:
1. Extração de Ácido Nucleico
O kit de extração de DNA comercializado pode ser realizado para extração de ácido nucleico, siga as instruções do kit.
2. amplificação por PCR
2.1 Calcule o número de amostras de teste, pegue n+2 tubos de reação de PCR e adicione 20 µl de solução de reação a cada tubo.
2.2 Adicione respectivamente 5 µl de ácido nucleico de controle negativo, controle positivo e amostras nos tubos de reação PRC acima, centrifugue a 8000 rpm por vários segundos e coloque-os na PCR quantitativa fluorescente.
2.3 As condições de reação devem ser definidas como:
Parâmetros de amplificação | |||
Sistema | O volume total é de 25µl | ||
Coleta de sinais | Sinal de fluorescência EHP | O canal FAM coleta o sinal de fluorescência | |
Condições de Reação de PCR | Estágio | Condições | ciclos |
Processo UNG | 37 ℃ por 2 minutos | 1 | |
Pré-desnaturação | 95 ℃ por 30 segundos | 1 | |
PCR | 95 ℃ por 10 segundos |
40 | |
60 ℃ por 30 segundos Definido para coletar o sinal fluorescente no final desta fase | |||
Interpretação dos resultados:
1. O julgamento de validade:
1.1 Controle Positivo: O valor Ct do canal FAM ≤ 32, e a curva de amplificação tem uma fase de crescimento exponencial significativa.
1.2 Controle Negativo: O canal FAM não tem curva de amplificação, ou a curva de amplificação é reta ou ligeiramente oblíqua.
2. O julgamento do resultado do teste:
Se o canal de detecção FAM da amostra de teste tiver sem curva de amplificação, pode ser determinado como EHP negativo.
Se o canal de detecção FAM tiver uma curva de amplificação de crescimento exponencial e o valor Ct for ≤ 36, pode ser determinado como EHP positivo.
36 amostras devem ser consideradas como resultados duvidosos, e a análise deve ser repetida para confirmação.
Precauções:
1. A gestão do laboratório deve estar em estrita conformidade com as especificações de gestão do laboratório de amplificação de genes por PCR.O pessoal do laboratório deve ser treinado profissionalmente.O processo experimental deve ser conduzido rigorosamente em diferentes áreas (área de preparação de reagentes, área de preparação de amostras, área de amplificação e análise de produtos).Todos os consumíveis devem ser descartáveis após a esterilização.Aparelhos, equipamentos e suprimentos especiais em cada estágio da operação do experimento não devem ser usados de forma cruzada.
2. Prepare a cabine de segurança biológica para o estágio de preparação de reagentes e amostras.O jaleco, luvas descartáveis e pipetador devem ser realizados durante o experimento.
3. O congelamento e descongelamento repetidos de reagentes devem ser evitados tanto quanto possível.Antes do uso, os reagentes devem ser completamente descongelados e centrifugados a 8000rpm por alguns segundos.
4. Por favor, coloque a pipeta usada na área de preparação da amostra no recipiente contendo desinfetante e descarte com o lixo após a esterilização.
5. Após o experimento, a mesa de trabalho e o pipetador foram tratados com hipoclorito 10% ou álcool 75% ou lâmpada ultravioleta.
Fabricação:
Nome: Shandong Xinda Gene Technology Co., Ltd
Uma subsidiária da Shandong Sinder Technology Co., Ltd
Endereço: Edifício B2, Parque Industrial de Bandaohuigu, Estrada Shungeng, Cidade Zhucheng, Província de Shandong
Código Postal: 262233
Telefone: +86 - 0532 5882 0810
