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RrealKit de Detecção de PCR em Tempo para Vírus da Peste Suína Clássica, Síndrome Reprodutiva e Respiratória Suína e vírus da pseudoraiva
[Nome do Produto] Kit de detecção por PCR em tempo real para vírus da peste suína clássica, síndrome reprodutiva e respiratória suína e vírus da pseudoraiva.
[Pacote] 50 testes
[Indicação] O Kit de Detecção de PCR em Tempo Real para Vírus da Peste Suína Clássica, Síndrome Reprodutiva e Respiratória Suína e Vírus da Pseudoraraiva é aplicável para detectar o ácido nucléico de CSFV/PRRSV/PRS em amostras de amígdalas, linfa, saliva, sangue e semem.Os resultados do teste são apenas para fins de pesquisa e não para diagnóstico clínico.
[Principais componentes e conteúdo]
Nome | Especificação | Quantidade |
Solução de reação CSFV/PRRSV/PRS | 1000µl/Tubo | 1 |
Controle Positivo CSFV/PRRSV/PRS | 250µl/Tubo | 1 |
Controle negativo | 250µl/Tubo | 1 |
[Armazenamento e Prazo de Validade]
Armazenado a -20±5℃, congelamento e descongelamento repetidos ≤ 3 vezes, o prazo de validade é de 12 meses.
[Método de teste]
1. Extração de Ácido Nucleico
Um kit de extração de DNA/RNA comercializado pode ser realizado para extração de ácido nucleico, siga as instruções do kit.
2. amplificação por PCR
2.1 Calcule o número de amostras de teste, pegue n+2 tubos de reação de PCR e adicione 20µl a de solução de reação para cada tubo.
2.2 Adicionar 5µl ácido nucleico do controle negativo, controle positivo e amostras nos tubos de reação PRC acima, respectivamente, centrifugar a 8000 rpm por vários segundos e colocá-los no termociclador.
2.3 As condições de reação são definidas da seguinte forma:
Parâmetros relevantes do amplificador | |||
Sistema | Volume total: 30µl | ||
Coleta de sinais | Vírus da Peste Suína Clássica (CSFV) - canal FAM coleta sinal de fluorescência | ||
Síndrome Reprodutiva e Respiratória Porcina (PRRS) - O canal HEX/VIC coleta o sinal de fluorescência | |||
Vírus da pseudoraiva (PRV) - canal ROX coleta sinal de fluorescência | |||
condições de reação de PCR | Estágio | Condition | número do ciclo |
Transcrição reversa | 50 ℃: 5 minutos | 1 | |
Pré-degeneração | 95 ℃: 30 segundos | 1 | |
PCR | 95 ℃: 10 segundos |
40 | |
60 ℃: 30 segundos (Defina para coletar o sinal fluorescente no final desta etapa) |
[Interpretação dos resultados]
1. Determinação da eficácia do kit de teste:
(1) Controle positivo: valor Ct dos canais FAM, HEX/VIC e ROX ≤ 32, curva de amplificação com fase exponencial óbvia.
(2) Controle negativo: Os canais FAM, HEX/VIC e ROX não possuem curva de amplificação ou a curva de amplificação é reta ou ligeiramente oblíqua.
2. Determinação dos resultados:
Julgamento do resultado | canal FAM | canal HEX/VIC | canal ROX |
CSFV ácido positivo | + | - | - |
PRRSV ácido nucleico positivo | - | + | - |
PRV ácido nucleico positivo | - | - | + |
CSFV e PRRSV ácido nucleico positivo | + | + | - |
CSFV e PRV ácido nucleico positivo | + | - | + |
PRRSV e PRV ácido nucleico positivo | - | + | + |
CSFV, PRRSV e PRV ácido nucleico positivo | + | + | + |
CSFV, PRRSV e PRV ácidos nucleicos negativos | - | - | - |
*Observação:
Se houver uma curva de amplificação de crescimento exponencial e valor Ct ≤ 36, é determinado como '+'.
Se não houver curva de amplificação, ela é determinada como '-'.
Se 36 < Valor Ct < 40, é um amostra duvidosa, e a análise deve ser repetida para confirmação.
[Precauções]
1. A gestão do laboratório deve seguir rigorosamente as especificações de gestão do laboratório de amplificação de genes por PCR.O pessoal do laboratório deve ser treinado profissionalmente.O processo experimental deve ser conduzido rigorosamente em diferentes áreas (área de preparação de reagentes, área de preparação de amostras, área de amplificação e análise de produtos).Todos os consumíveis devem ser descartáveis após a esterilização.Aparelhos, equipamentos e suprimentos especiais em cada estágio da operação do experimento não devem ser usados de forma cruzada.
2. Prepare a cabine de segurança biológica para o estágio de preparação de reagentes e amostras.O jaleco, luvas descartáveis e pipeta devem ser realizados durante o experimento.
3. O congelamento e descongelamento repetidos de reagentes devem ser evitados tanto quanto possível.Antes do uso, os reagentes devem ser completamente descongelados e centrifugados a 8000rpm por alguns segundos.
4. Por favor, coloque a pipeta usada na área de preparação da amostra no recipiente contendo desinfetante e descarte com o lixo após a esterilização.
5. Após o experimento, a mesa de trabalho e a pipeta devem ser tratadas com hipoclorito 10% ou álcool 75% ou lâmpada ultravioleta.
[Fabricação]
Nome: Shandong Xinda Gene Technology Co., Ltd
Uma subsidiária da Shandong Sinder Technology Co., Ltd
Endereço: Edifício B2, Parque Industrial Bandaohuigu, Estrada Shungeng, Cidade Zhucheng, Província de Shandong
Código Postal: 262233
Telefone: +86 - 0532 5882 0810
RrealKit de Detecção de PCR em Tempo para Vírus da Peste Suína Clássica, Síndrome Reprodutiva e Respiratória Suína e vírus da pseudoraiva
[Nome do Produto] Kit de detecção por PCR em tempo real para vírus da peste suína clássica, síndrome reprodutiva e respiratória suína e vírus da pseudoraiva.
[Pacote] 50 testes
[Indicação] O Kit de Detecção de PCR em Tempo Real para Vírus da Peste Suína Clássica, Síndrome Reprodutiva e Respiratória Suína e Vírus da Pseudoraraiva é aplicável para detectar o ácido nucléico de CSFV/PRRSV/PRS em amostras de amígdalas, linfa, saliva, sangue e semem.Os resultados do teste são apenas para fins de pesquisa e não para diagnóstico clínico.
[Principais componentes e conteúdo]
Nome | Especificação | Quantidade |
Solução de reação CSFV/PRRSV/PRS | 1000µl/Tubo | 1 |
Controle Positivo CSFV/PRRSV/PRS | 250µl/Tubo | 1 |
Controle negativo | 250µl/Tubo | 1 |
[Armazenamento e Prazo de Validade]
Armazenado a -20±5℃, congelamento e descongelamento repetidos ≤ 3 vezes, o prazo de validade é de 12 meses.
[Método de teste]
1. Extração de Ácido Nucleico
Um kit de extração de DNA/RNA comercializado pode ser realizado para extração de ácido nucleico, siga as instruções do kit.
2. amplificação por PCR
2.1 Calcule o número de amostras de teste, pegue n+2 tubos de reação de PCR e adicione 20µl a de solução de reação para cada tubo.
2.2 Adicionar 5µl ácido nucleico do controle negativo, controle positivo e amostras nos tubos de reação PRC acima, respectivamente, centrifugar a 8000 rpm por vários segundos e colocá-los no termociclador.
2.3 As condições de reação são definidas da seguinte forma:
Parâmetros relevantes do amplificador | |||
Sistema | Volume total: 30µl | ||
Coleta de sinais | Vírus da Peste Suína Clássica (CSFV) - canal FAM coleta sinal de fluorescência | ||
Síndrome Reprodutiva e Respiratória Porcina (PRRS) - O canal HEX/VIC coleta o sinal de fluorescência | |||
Vírus da pseudoraiva (PRV) - canal ROX coleta sinal de fluorescência | |||
condições de reação de PCR | Estágio | Condition | número do ciclo |
Transcrição reversa | 50 ℃: 5 minutos | 1 | |
Pré-degeneração | 95 ℃: 30 segundos | 1 | |
PCR | 95 ℃: 10 segundos |
40 | |
60 ℃: 30 segundos (Defina para coletar o sinal fluorescente no final desta etapa) |
[Interpretação dos resultados]
1. Determinação da eficácia do kit de teste:
(1) Controle positivo: valor Ct dos canais FAM, HEX/VIC e ROX ≤ 32, curva de amplificação com fase exponencial óbvia.
(2) Controle negativo: Os canais FAM, HEX/VIC e ROX não possuem curva de amplificação ou a curva de amplificação é reta ou ligeiramente oblíqua.
2. Determinação dos resultados:
Julgamento do resultado | canal FAM | canal HEX/VIC | canal ROX |
CSFV ácido positivo | + | - | - |
PRRSV ácido nucleico positivo | - | + | - |
PRV ácido nucleico positivo | - | - | + |
CSFV e PRRSV ácido nucleico positivo | + | + | - |
CSFV e PRV ácido nucleico positivo | + | - | + |
PRRSV e PRV ácido nucleico positivo | - | + | + |
CSFV, PRRSV e PRV ácido nucleico positivo | + | + | + |
CSFV, PRRSV e PRV ácidos nucleicos negativos | - | - | - |
*Observação:
Se houver uma curva de amplificação de crescimento exponencial e valor Ct ≤ 36, é determinado como '+'.
Se não houver curva de amplificação, ela é determinada como '-'.
Se 36 < Valor Ct < 40, é um amostra duvidosa, e a análise deve ser repetida para confirmação.
[Precauções]
1. A gestão do laboratório deve seguir rigorosamente as especificações de gestão do laboratório de amplificação de genes por PCR.O pessoal do laboratório deve ser treinado profissionalmente.O processo experimental deve ser conduzido rigorosamente em diferentes áreas (área de preparação de reagentes, área de preparação de amostras, área de amplificação e análise de produtos).Todos os consumíveis devem ser descartáveis após a esterilização.Aparelhos, equipamentos e suprimentos especiais em cada estágio da operação do experimento não devem ser usados de forma cruzada.
2. Prepare a cabine de segurança biológica para o estágio de preparação de reagentes e amostras.O jaleco, luvas descartáveis e pipeta devem ser realizados durante o experimento.
3. O congelamento e descongelamento repetidos de reagentes devem ser evitados tanto quanto possível.Antes do uso, os reagentes devem ser completamente descongelados e centrifugados a 8000rpm por alguns segundos.
4. Por favor, coloque a pipeta usada na área de preparação da amostra no recipiente contendo desinfetante e descarte com o lixo após a esterilização.
5. Após o experimento, a mesa de trabalho e a pipeta devem ser tratadas com hipoclorito 10% ou álcool 75% ou lâmpada ultravioleta.
[Fabricação]
Nome: Shandong Xinda Gene Technology Co., Ltd
Uma subsidiária da Shandong Sinder Technology Co., Ltd
Endereço: Edifício B2, Parque Industrial Bandaohuigu, Estrada Shungeng, Cidade Zhucheng, Província de Shandong
Código Postal: 262233
Telefone: +86 - 0532 5882 0810