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Kit de Detecção de PCR em Tempo Real para Vírus da Peste Suína Africana (VP72/I177L)
【Nome do Produto】Kit de Defecção por PCR em Tempo Real para Vírus da Peste Suína Africana (VP72/I177L)
【Pacote】50 kits/caixa
【Indicação】O kit de detecção do vírus da peste suína africana é aplicável para detectar o DNA do subtipo VP72/I177L do vírus da peste suína africana em saliva, sangue, tecido e amostras ambientais de porco.Os resultados do teste são apenas para fins de pesquisa e não para diagnóstico clínico
【Principais componentes e conteúdo】
Nome | Especificação | Quantidade |
1000µl/Tubo | 1 | |
ASFV (VP72/I177L) Controle Positivo | 250µl/Tubo | 1 |
Controle negativo | 250µl/Tubo | 1 |
【Armazenamento e Prazo de Validade】
Armazenado a -20 ± 5 ℃, congelamento e descongelamento repetidos ≤ 3 vezes, a vida útil é de 12 meses.
【Aplicativo】ABI QuantStudio 5, CFX Opus 96, LightCycler 480, Gentier 96E/96R, LineGene 9600 Plus e outros instrumentos de PCR em tempo real.
【Método de teste】
1. Extração de Ácido Nucleico
O kit de extração de DNA comercializado pode ser realizado para extração de ácido nucleico, siga as instruções do kit.
2. amplificação por PCR
2.1 Calcule o número de amostras de teste, pegue n+2 tubos de reação de PCR e adicione 20 µl de solução de reação a cada tubo.
2.2 Adicione 5 µl de ácido nucleico de controle negativo, controle positivo e amostras nos tubos de reação PRC acima, respectivamente, centrifugue a 8000 rpm por vários segundos e coloque-os no PCR em tempo real...
2.3 As condições de reação são definidas da seguinte forma:
Parâmetros relevantes do amplificador | |||
Sistema | Volume total: 25µl | ||
Coleta de sinais | Sinal Fluorescente ASFV (VP72/I177L) | I177L-HEXchannel coleta sinal de fluorescência | |
O canal VP72-FAM coleta sinal de fluorescência | |||
condições de reação de PCR | Estágio | Condition | número do ciclo |
processamento UNG | 37 ℃: 2 minutos | 1 | |
Pré-degeneração | 95 ℃: 30 segundos | 1 | |
PCR | 95 ℃: 10 segundos |
40 | |
60 ℃: 30 segundos (Defina para coletar o sinal fluorescente no final deste estágio) |
【Interpretação dos resultados】
1. Determinação da eficácia do kit de teste:
(1) Controle positivo: valor Ct dos canais FAM e HEX ≤ 32, curva de amplificação com fase exponencial óbvia.
(2) Controle negativo: Os canais FAM e HEX não possuem curva de amplificação, ou a curva de amplificação é reta ou ligeiramente oblíqua.
2. Determinação dos resultados:
Julgamento do resultado | canal FAM | canal HEX |
- | + | |
VP72 ASFV ácido nucleico positivo | + | - |
VP72 e I177L ASFV ácido nucleico positivo | + | + |
VP72 e I177L ASFV ácido nucleico negativo | - | - |
*Observação:
(1) Se houver uma curva de amplificação exponencial crescente e valor de Ct ≤ 36, pode ser determinado como '+'.Se não houver curva de amplificação, ela pode ser determinada como '-'.Quando 36 < valor Ct <40, as amostras devem ser consideradas como resultados duvidosos e a análise deve ser repetida para confirmação.
【Precauções】
1. A gestão do laboratório deve estar em estrita conformidade com as especificações de gestão do laboratório de amplificação de genes por PCR.O pessoal do laboratório deve ser treinado profissionalmente.O processo experimental deve ser conduzido rigorosamente em diferentes áreas (área de preparação de reagentes, área de preparação de amostras, área de amplificação e análise de produtos).Todos os consumíveis devem ser descartáveis após a esterilização.Aparelhos, equipamentos e suprimentos especiais em cada estágio da operação do experimento não devem ser usados de forma cruzada.
2. Por favor, prepare a cabine de segurança biológica para o estágio de preparação de reagentes e amostras.O jaleco, luvas descartáveis e pipetador devem ser realizados durante o experimento.
3. O congelamento e descongelamento repetidos de reagentes devem ser evitados tanto quanto possível.Antes do uso, os reagentes devem ser completamente descongelados e centrifugados a 8000rpm por alguns segundos.
4. Por favor, coloque a pipeta usada na área de preparação da amostra no recipiente contendo desinfetante e descarte com o lixo após a esterilização.
5. Após o experimento, a mesa de trabalho e o pipetador foram tratados com hipoclorito 10% ou álcool 75% ou lâmpada ultravioleta.
【Fabricação】
Nome: Shandong Xinda Gene Technology Co., Ltd
Uma subsidiária da Shandong Sinder Technology Co., Ltd
Endereço: Edifício B2, Parque Industrial Bandaohuigu, Estrada Shungeng, Cidade Zhucheng, Província de Shandong
Código Postal: 262233
Telefone: +86 - 0532 5882 0810
Kit de Detecção de PCR em Tempo Real para Vírus da Peste Suína Africana (VP72/I177L)
【Nome do Produto】Kit de Defecção por PCR em Tempo Real para Vírus da Peste Suína Africana (VP72/I177L)
【Pacote】50 kits/caixa
【Indicação】O kit de detecção do vírus da peste suína africana é aplicável para detectar o DNA do subtipo VP72/I177L do vírus da peste suína africana em saliva, sangue, tecido e amostras ambientais de porco.Os resultados do teste são apenas para fins de pesquisa e não para diagnóstico clínico
【Principais componentes e conteúdo】
Nome | Especificação | Quantidade |
1000µl/Tubo | 1 | |
ASFV (VP72/I177L) Controle Positivo | 250µl/Tubo | 1 |
Controle negativo | 250µl/Tubo | 1 |
【Armazenamento e Prazo de Validade】
Armazenado a -20 ± 5 ℃, congelamento e descongelamento repetidos ≤ 3 vezes, a vida útil é de 12 meses.
【Aplicativo】ABI QuantStudio 5, CFX Opus 96, LightCycler 480, Gentier 96E/96R, LineGene 9600 Plus e outros instrumentos de PCR em tempo real.
【Método de teste】
1. Extração de Ácido Nucleico
O kit de extração de DNA comercializado pode ser realizado para extração de ácido nucleico, siga as instruções do kit.
2. amplificação por PCR
2.1 Calcule o número de amostras de teste, pegue n+2 tubos de reação de PCR e adicione 20 µl de solução de reação a cada tubo.
2.2 Adicione 5 µl de ácido nucleico de controle negativo, controle positivo e amostras nos tubos de reação PRC acima, respectivamente, centrifugue a 8000 rpm por vários segundos e coloque-os no PCR em tempo real...
2.3 As condições de reação são definidas da seguinte forma:
Parâmetros relevantes do amplificador | |||
Sistema | Volume total: 25µl | ||
Coleta de sinais | Sinal Fluorescente ASFV (VP72/I177L) | I177L-HEXchannel coleta sinal de fluorescência | |
O canal VP72-FAM coleta sinal de fluorescência | |||
condições de reação de PCR | Estágio | Condition | número do ciclo |
processamento UNG | 37 ℃: 2 minutos | 1 | |
Pré-degeneração | 95 ℃: 30 segundos | 1 | |
PCR | 95 ℃: 10 segundos |
40 | |
60 ℃: 30 segundos (Defina para coletar o sinal fluorescente no final deste estágio) |
【Interpretação dos resultados】
1. Determinação da eficácia do kit de teste:
(1) Controle positivo: valor Ct dos canais FAM e HEX ≤ 32, curva de amplificação com fase exponencial óbvia.
(2) Controle negativo: Os canais FAM e HEX não possuem curva de amplificação, ou a curva de amplificação é reta ou ligeiramente oblíqua.
2. Determinação dos resultados:
Julgamento do resultado | canal FAM | canal HEX |
- | + | |
VP72 ASFV ácido nucleico positivo | + | - |
VP72 e I177L ASFV ácido nucleico positivo | + | + |
VP72 e I177L ASFV ácido nucleico negativo | - | - |
*Observação:
(1) Se houver uma curva de amplificação exponencial crescente e valor de Ct ≤ 36, pode ser determinado como '+'.Se não houver curva de amplificação, ela pode ser determinada como '-'.Quando 36 < valor Ct <40, as amostras devem ser consideradas como resultados duvidosos e a análise deve ser repetida para confirmação.
【Precauções】
1. A gestão do laboratório deve estar em estrita conformidade com as especificações de gestão do laboratório de amplificação de genes por PCR.O pessoal do laboratório deve ser treinado profissionalmente.O processo experimental deve ser conduzido rigorosamente em diferentes áreas (área de preparação de reagentes, área de preparação de amostras, área de amplificação e análise de produtos).Todos os consumíveis devem ser descartáveis após a esterilização.Aparelhos, equipamentos e suprimentos especiais em cada estágio da operação do experimento não devem ser usados de forma cruzada.
2. Por favor, prepare a cabine de segurança biológica para o estágio de preparação de reagentes e amostras.O jaleco, luvas descartáveis e pipetador devem ser realizados durante o experimento.
3. O congelamento e descongelamento repetidos de reagentes devem ser evitados tanto quanto possível.Antes do uso, os reagentes devem ser completamente descongelados e centrifugados a 8000rpm por alguns segundos.
4. Por favor, coloque a pipeta usada na área de preparação da amostra no recipiente contendo desinfetante e descarte com o lixo após a esterilização.
5. Após o experimento, a mesa de trabalho e o pipetador foram tratados com hipoclorito 10% ou álcool 75% ou lâmpada ultravioleta.
【Fabricação】
Nome: Shandong Xinda Gene Technology Co., Ltd
Uma subsidiária da Shandong Sinder Technology Co., Ltd
Endereço: Edifício B2, Parque Industrial Bandaohuigu, Estrada Shungeng, Cidade Zhucheng, Província de Shandong
Código Postal: 262233
Telefone: +86 - 0532 5882 0810